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福建干細(xì)胞外泌體美容注射國(guó)家允許嗎暨南大學(xué)

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所有培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。
有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。
外泌體被視為特分泌的膜泡,,參與細(xì)胞間通訊,,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā),。
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一類(lèi)外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種,。
它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,,有文獻(xiàn)報(bào)道稱(chēng)RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體,。
現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。
除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1,、2,、4、5,、6,、7、11等),。
外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9)),、
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熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細(xì)胞特的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源),、CD86(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)以及乳凝集素(不成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞),。
其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類(lèi)的酶(GAPDH, 烯醇化酶 1, 醛縮酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 親環(huán)素 A,FASN, MDH1 和CNP)、核糖體蛋白(RPS3),、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子(黑色素瘤分化相關(guān)因子, ARF1, CD2, 人類(lèi)紅細(xì)胞膜整合蛋白, SLC9A3R1),、粘附因子(MFGE8、整合素),、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等,。
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一是超速離心法,,這是外泌體提取最常用的方法 ,。
此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,, 由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 ,。
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三是密度梯度離心法, 用此種方法分離到 的外泌體純度 高,,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),,量少,。

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五是PS親和法,,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。
該方法與免疫磁珠法相似,,獲得的外泌體形態(tài)完整,,純度。
由于不使用變性劑,,不影響外泌體的生物活性,,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。
2016.9 《Scientific Reports》 雜志發(fā)表了該方法數(shù)據(jù),,表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。
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