所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。
有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應功能的分子機制剛剛開始研究。
外泌體被視為特分泌的膜泡,,參與細胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。

一類外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種,。
它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,,有文獻報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體,。
現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。
除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1,、2,、4、5,、6,、7、11等),。
外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9)),、

熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細胞特的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源),、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞),。
其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶(GAPDH, 烯醇化酶 1, 醛縮酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 親環(huán)素 A,FASN, MDH1 和CNP)、核糖體蛋白(RPS3),、信號轉(zhuǎn)導因子(黑色素瘤分化相關(guān)因子, ARF1, CD2, 人類紅細胞膜整合蛋白, SLC9A3R1),、粘附因子(MFGE8、整合素),、細胞骨架蛋白以及泛素等,。
一是超速離心法,,這是外泌體提取最常用的方法 ,。
此種方法得到的外泌體量多,純度不足,,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,, 由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 ,。
三是密度梯度離心法, 用此種方法分離到 的外泌體純度 高,,前期準備工作繁雜,,耗時,,量少,。
五是PS親和法,,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。
該方法與免疫磁珠法相似,,獲得的外泌體形態(tài)完整,,純度。
由于不使用變性劑,,不影響外泌體的生物活性,,外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。
2016.9 《Scientific Reports》 雜志發(fā)表了該方法數(shù)據(jù),,表明PS法可提取相當高純度的外泌體,。