關(guān)鍵詞：TMT標(biāo)記的定量磷酸化蛋白組學(xué),蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué),tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定

TMT（Tandem Mass Tag）串聯(lián)質(zhì)量標(biāo)簽是一種基于體外肽標(biāo)記的蛋白質(zhì)定量技術(shù),，旨在使用串聯(lián)質(zhì)譜MS對不同樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定和定量,。TMT定量技術(shù)將蛋白質(zhì)利用TMT試劑進(jìn)行標(biāo)記，所有TMT試劑標(biāo)簽具有相同的質(zhì)量，由氨基反應(yīng)基團(tuán),、質(zhì)量平衡基團(tuán)和質(zhì)量報(bào)告基團(tuán)組成,，其中質(zhì)量平衡基團(tuán)和質(zhì)量報(bào)告基團(tuán)的分子量各不相同,。因此,，被TMT標(biāo)記的不同來源的蛋白肽段在一級質(zhì)譜中表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比；在二級質(zhì)譜中,，通過剪切斷裂釋放出報(bào)告基團(tuán),，由此得到離子峰強(qiáng)度與離子峰質(zhì)荷比，通過軟件結(jié)合相應(yīng)數(shù)據(jù)庫對離子峰強(qiáng)度和質(zhì)荷比值進(jìn)行分析,，可以計(jì)算樣品蛋白的含量,。

TMT技術(shù)可對多種蛋白樣品進(jìn)行定量鑒定，包括各種翻譯后修飾蛋白,，如磷酸化蛋白等,。TMT標(biāo)記的定量磷酸化蛋白組學(xué)即利用TMT標(biāo)記定量技術(shù)對磷酸化蛋白進(jìn)行定量分析,其定量方法與進(jìn)行普通蛋白的原理都相同，只是由于在正常生理狀態(tài)下磷酸化修飾的水平較低,，因此通常需要對酶切后的磷酸化肽段進(jìn)行富集,，如抗體富集、IMAC富集以及TiO2富集等,，以提高磷酸化修飾肽段的豐度,，保證質(zhì)譜檢測結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確性。

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