一些細(xì)胞和組織可在懸浮狀態(tài)下生長,，但相當(dāng)一部分哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要表面貼壁,。
因此，用于提供細(xì)胞體外培養(yǎng)環(huán)境的培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿除了具有良好的透明度和無毒,、無菌外，還需經(jīng)表面改性處理使之能夠貼壁,、分裂和生長,。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶特征
厚度均勻,，底部無畸變；
密封蓋/濾膜蓋（0.22μm疏水膜）,；
設(shè)計(jì)的瓶蓋可快速旋轉(zhuǎn),；
側(cè)面可疊放，更有效地利用培養(yǎng)箱,；
無毒，無DNA/RAN酶,；
伽馬射線消毒滅菌,。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶的分類：
培養(yǎng)瓶的瓶頸也有多種樣式，有直頸,、斜頸,、角度頸、三角形,、矩形,。
直頸：可以減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋里；
斜頸：易于傾注,，移液管或者細(xì)胞刮容易進(jìn)入瓶體,；
角度頸：移液管或者細(xì)胞刮易于進(jìn)入瓶身，并且可減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋,；
三角形：移液管或細(xì)胞刮更易達(dá)到瓶角,，寬底增加穩(wěn)定性；
矩形：斜頸的矩形培養(yǎng)瓶瓶底至瓶頸是一個(gè)坡度設(shè)計(jì),，易于傾注,，移液管或者細(xì)胞刮容易進(jìn)入瓶體，大部分斜頸瓶都有一個(gè)裙邊以增加穩(wěn)定性,。
直頸和角度頸的矩形培養(yǎng)瓶整個(gè)瓶底都是培養(yǎng)面,，節(jié)省空間并減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋。
培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿的區(qū)別
培養(yǎng)瓶適合長期培養(yǎng),、傳代,、作為種子細(xì)胞。
不易污染,。
培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板適合在各種實(shí)驗(yàn)中選用,，臨時(shí)培養(yǎng)。
培養(yǎng)面積T25約為25,，T75為75,。
6孔板、10/孔,。
12孔板4/孔,。
培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿的區(qū)別在于,，安全系數(shù)的高低、培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量的多少,。
個(gè)人感覺培養(yǎng)瓶的安全系數(shù)更高,，操作也比較方便。
培養(yǎng)瓶瓶可以用來做相對(duì)大規(guī)模的培養(yǎng)或比較容易被污染的細(xì)胞,。
而培養(yǎng)皿比較適合小規(guī)模的培養(yǎng)或做一些對(duì)照分析實(shí)驗(yàn),。
細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和,，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長,，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）,。
傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞保存下去的方法,。
同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。
懸浮性細(xì)胞直接分瓶就可以,，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶,。
具體操作步驟如下：
將長滿細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。
加入0.5—1ml 0.25％胰酶溶液,，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中,。
瓶口塞好橡皮塞，放在倒置鏡下觀察細(xì)胞,。
隨著時(shí)間的推移,，原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時(shí)將胰酶棄去,，加入10ml培養(yǎng)液終止消化,。
觀察消化也可以用肉眼，當(dāng)見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)針孔空隙時(shí)終止消化,。
一般室溫消化時(shí)間約為1—3分鐘,。
用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分到另外兩到三瓶中,，實(shí)踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,，置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。
第二天觀察貼壁生長情況,。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶在細(xì)胞傳代中的應(yīng)用,，消化液的配制方法如下：稱取0.25克胰酶蛋白酶（活力為1：250），加入100ml無Ca2+,、Mg2+的Hank’s液溶解,，濾器過濾除菌，4℃保存，用前可在37℃下回溫,。
胰酶溶液中也可加入EDTA,，使終濃度達(dá)0.02％。
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