人甲基CpG結(jié)合蛋白2(MECP2) ELISA試劑盒技術(shù)提示： 1,、混合蛋白溶液時,，避免起泡。 2,、加校準(zhǔn)品與樣本時,，每個校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應(yīng)該懸臂加樣,， 避免交叉污染,。 3、合適的溫育時間,，和充分的洗滌步驟,，是保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。 4,、使用自動洗板機時,，加入一個 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度,。 5,、底物溶液為無色液體，保存過程中變?yōu)樗{(lán)色,，代表底物溶液已經(jīng)失效,，不得使用。 6,、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,，加入終止液后，藍(lán)色底物產(chǎn)物,，會瞬間變?yōu)辄S 色,。 7、實驗中,，用剩的板條,，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存,。 8,、所有液體組分，使用前充分搖勻,，嚴(yán)格按照說明書標(biāo)明的時間,、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫 育操作。

上海軒澤康生物ELISA試劑盒技術(shù)指南：【關(guān)于ELISA試驗的穩(wěn)定性問題】

1. 做ELISA實驗時,，結(jié)果老是重復(fù)性不上,，相同的材料和相同的操作方法做出的結(jié)果就截然不同,，上午做時OD在1.5，下午做時就是0.9了,，都沒有辦法下為什么會差異這么大呀,？答：（1）多設(shè)平行空孔；請別人代勞,，以判斷究竟是否操作問題,。（2）對于活性非常高的包被物和酶標(biāo)記物，如果第,、一次選擇的范圍恰好在其平臺位置邊緣,。那么在重復(fù)的時候每次取樣帶來的微量誤差就很容易導(dǎo)致大的偏差了。特別時線性比較好的原料試劑,，這個就很正常了,。建議每次取樣的時候只使槍尖一點點位于液面下，以免吸嘴外面沾有少量抗原或者抗體或酶而使結(jié)果重復(fù)不上,。

2.  酶不穩(wěn)定,，有何高招？答：（1）保存濃度盡量高些,。（2）可以添加牛血清蛋白等蛋白保護劑,，以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。（3）加入50%甘油-20℃保存,，避免反復(fù)凍融,。（4）還可以加入防腐劑防止長菌（注意不能使用疊氮鈉，其對HRP活性有很大影響,。（5）現(xiàn)在一些公司也有商品化的酶標(biāo)保護劑供應(yīng),，可以考慮一下。酶類的穩(wěn)定性與保存方法有很大的關(guān)系,。干燥的制品一般比較穩(wěn)定,，在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化，貯藏要求簡單,，只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封,，保持0-4℃冰箱即可。液態(tài)穩(wěn)定性較差,，貯藏時應(yīng)注意以下幾點：1.樣品不能太稀,，必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏，樣品太稀易降解,、變性,。2.一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑,，酶常用的穩(wěn)定劑有硫酸銨糊,、蔗糖,、甘油等，也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性,。鈣,、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護作用,。3.貯藏溫度要求低,，避免反復(fù)凍融。