1 范圍

本標準規(guī)定了實驗動物90天經(jīng)口毒性試驗的基本試驗方法和技術要求,。

本標準適用于評價受試物的亞慢性毒性作用。

2 術語和定義

2.1 亞慢性毒性

實驗動物在不超過其壽命期限10%的時間內(大鼠通常為90d),重復經(jīng)口接觸受試物后引起的健康損害效應,。

2.2 未觀察到有害作用劑量

通過動物試驗,，以現(xiàn)有的技術手段和檢測指標未觀察到任何與受試物有關的毒性作用的*大劑量,。

2.3 *小觀察到有害作用劑量

在規(guī)定的條件下,受試物引起實驗動物組織形態(tài),、功能,、生長發(fā)育等有害效應的*小作用劑量。

2.4 靶器官

實驗動物出現(xiàn)由受試物引起明顯毒性作用的器官,。

2.5 衛(wèi)星組

在毒性研究設計和實施中外加的動物組,其處理和飼養(yǎng)條件與主要研究的動物相似,用于試驗中期或試驗結束恢復期觀察和檢測,，也可用于不包括在主要研究內的其他指標及參數(shù)的觀察和檢測。

3 試驗目的和原理

確定在90d內經(jīng)口重復接觸受試物引起的毒性效應，了解受試物劑量-反應關系,、毒作用靶器官和可逆性,得出90d經(jīng)口*小觀察到有害作用劑量(LOAEL)和未觀察到有害作用劑量(NOAEL),初步確定受試物的經(jīng)口安全性,并為慢性毒性試驗劑量、觀察指標,、毒性終點的選擇以及獲得“暫定的人體健康指導值”提供依據(jù),。

4 儀器和試劑

4.1 儀器/器械

實驗室常用解剖器械、電子天平,、生物顯微鏡,、檢眼鏡、血生化分析儀,、血液分析儀,、凝血分析儀、尿液分析儀,、心電圖掃描儀,、離心機、病理切片機等,。

4.2 試劑

甲醛,、二甲苯、乙醇,、蘇木素,、伊紅、石蠟,、血球分析儀稀釋劑,、血生化分析試劑、凝血分析試劑,、尿液分析試劑(或試紙)等,。

5 試驗方法

5.1 受試物

受試物應使用原始樣品，若不能使用原始樣品,，應按照受試物處理原則對受試物進行適當處理,。將受試物摻入飼料、飲用水或灌胃給予,。

5.2 實驗動物

5.2.1 動物選擇

實驗動物的選擇應符合GB14922.1和GB14922.2的有關規(guī)定,。選擇已有資料證明對受試物敏感的動物物種和品系，一般嚙齒類動物**大鼠,非嚙齒類動物**犬(通常選用BeagIe 犬),。大鼠周齡推薦不超過6周,，體重50g~100g。試驗開始時每個性別動物體重差異不應超過平均體重的±20%,每組動物數(shù)不少于20只,雌雄各半;若計劃試驗中期觀察或試驗結束做恢復期的觀察,應增加動物數(shù)(對照和高劑量增加衛(wèi)星組,，每組10只,，雌雄各半)。犬通常選用4個月～6個月的幼犬，一般不超過9個月,，試驗開始時每個性別動物體重差異不應超過平均體重的±20%,每組動物數(shù)不少于8只,，雌雄各半;若計劃試驗中間尸檢或試驗結束做恢復期的觀察,應增加動物數(shù)(對照和高劑量增加衛(wèi)星組,每組4只,雌雄各半)。對照組動物性別和數(shù)量應與受試物組相同,。

5.2.2 動輸準備

試驗前大鼠在實驗動物房至少應進行3d～5d(犬7d～14d)環(huán)境適應和檢疫觀察,。

5.2.3 動物飼養(yǎng)

實驗動物飼養(yǎng)條件應符合GB14925、飲用水應符合GB5749,、飼料應符合GB14924的有關規(guī)定,。試驗期間動物自由飲水和攝食,動物推薦單籠飼養(yǎng),大鼠也可按組分性別分籠群飼,每籠動物數(shù)(一般不超過3只)應滿足實驗動物*低需要的空間，以不影響動物自由活動和觀察動物的體征為宜,。試驗期間每組動物非試驗因素死亡率應小于10%,瀕死動物應盡可能進行血液生化指標檢測,、大體解剖以及病理組織學檢查，每組生物標本損失率應小于10%,。