國產(chǎn)的細胞培養(yǎng)瓶一般蓋子都是封閉的,,不帶內(nèi)墊,,常用于密閉培養(yǎng),可保證其密閉性,;進口的培養(yǎng)瓶的蓋子樣式比較多:密閉蓋,、聚酯蓋,、透氣蓋、隔墊蓋等,。
密閉蓋的性能和國產(chǎn)的是相同的,,聚酯蓋常用于開放培養(yǎng),只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶內(nèi)氣體與環(huán)境中氣體的交換,。
透氣蓋是在瓶蓋中加了0.2μm疏水濾膜,,提供無菌氣體交換,減少污染的風(fēng)險,。
常用于開放培養(yǎng),,推薦用于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),尤其適用于需要長期培養(yǎng)的實驗,。
隔墊蓋是在隔墊上帶有預(yù)切割口,,這樣可以使吸嘴(或者5ml以下規(guī)格的移液管)穿插隔墊進行加液、吸液或者收獲細胞,減少污染的機會,,維持培養(yǎng)瓶封閉無菌的環(huán)境,。
細胞在細胞培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,,為使細胞能繼續(xù)生長,,也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng)),。
傳代培養(yǎng)也是一種將細胞保存下去的方法,。
也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。
懸浮性細胞直接分瓶就可以,,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
具體操作步驟如下:
將長滿細胞的細胞培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去,。
加入0.5—1ml 0.25%胰酶溶液,,使瓶底細胞都浸入溶液中。
瓶口塞好橡皮塞,,放在倒置鏡下觀察細胞,。
隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,,在還未漂起時將胰酶棄去,,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。
觀察消化也可以用肉眼,,當見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細針孔空隙時終止消化,。
一般室溫消化時間約為1—3分鐘。
用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,,分到兩到三瓶中,,實踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng),。
第二天觀察貼壁生長情況,。
以上是細胞培養(yǎng)瓶在細胞傳代中的應(yīng)用,消化液的配制方法如下:稱取0.25克胰酶蛋白酶(活力為1:250),,加入100ml無Ca2+,、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過濾除菌,,4℃保存,,用前可在37℃下回溫。
胰酶溶液中也可加入EDTA,,使終濃度達0.02%,。

培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿的區(qū)別
培養(yǎng)瓶適合長期培養(yǎng)、傳代、作為種子細胞,。
不易污染,。
培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板適合在各種實驗中選用,臨時培養(yǎng),。
培養(yǎng)面積T25約為25,,T75為75。
6孔板,、10/孔,。
12孔板4/孔。
培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿的區(qū)別在于,,安全系數(shù)的高低,、培養(yǎng)細胞數(shù)量的多少。
個人感覺培養(yǎng)瓶的安全系數(shù)更高,,操作也比較方便,。
培養(yǎng)瓶瓶可以用來做相對大規(guī)模的培養(yǎng)或比較容易被污染的細胞。
而培養(yǎng)皿比較適合小規(guī)模的培養(yǎng)或做一些對照分析實驗,。

培養(yǎng)瓶主要分類
按細胞對產(chǎn)品的貼壁要求分為三類:
普通型適合細胞和組織的懸浮培養(yǎng),;
標準型具有良好的細胞貼壁性能,適用于細胞的貼壁生長,;
型表面含有含氮官能團,,能促進某些細胞(如細胞)的貼壁、生長和分化,。
按瓶子外形分為:
寬體培養(yǎng)瓶,;
三角培養(yǎng)瓶;
斜頸培養(yǎng)瓶,。

細胞培養(yǎng)瓶特征
厚度均勻,,底部無畸變;
密封蓋/濾膜蓋(0.22μm疏水膜),;
設(shè)計的瓶蓋可快速旋轉(zhuǎn),;
側(cè)面可疊放,更有效地利用培養(yǎng)箱,;
無毒,,無DNA/RAN酶;
伽馬射線消毒滅菌,。
我們專心做高品質(zhì)產(chǎn)品,,不斷增強產(chǎn)品技術(shù)含量,豐富產(chǎn)品種類,,強化解決方案式系統(tǒng)化服務(wù),,逐步實現(xiàn)產(chǎn)品升級,,提升企業(yè)核心競爭力。